Acute and subchronic effects of petroleum on the freshwater fish Hoplias aff. malabaricus

Abstract Petroleum water soluble fraction (WSF) impairs organisms, but damages may vary among cell and tissue levels. The aim of the present study was to evaluate the acute (24 h, 48 h, 72 h) and subchronic effects (36 days) of WSF (0%, 25% and 100%) in juveniles of the Neotropical top predator fish Hoplias aff. malabaricus. The effects of WSF were evaluated at a molecular level using the comet assay and micronucleus test for genome damage; and at a morphological level through histological identification of liver pathologic lesions. In both acute and subchronic exposure we found low levels of DNA damage ( 10% of comet tail) and non-significant frequency of micronucleus in WSF exposed fish. The most significant liver lesions in WSF exposed fish were fatty vacuolization, hypertrophy and focal necrosis. Since these tissue injuries were progressive and persistent, their irreversibility may negatively affect fish recruitment, even in a such resistant top predator.

Resumo A fração solúvel de petróleo (WSF) prejudica os organismos, porém os danos podem variar entre os níveis celular e tecidual. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito agudo (24 h, 48 h e 72 h) e subcrônico (36 dias) da WSF (0%, 25% e 100%) em juvenis do peixe neotropical predador topo Hoplias aff. malabaricus. Os efeitos da WSF foram avaliados no nível molecular utilizando o ensaio do cometa e o teste do micronúcleo para o dano genômico e no nível morfológico através da identificação histológica de lesões patológicas no fígado. Em ambas exposições (aguda e subcrônica) encontramos baixos níveis de dano no DNA ( 10% de DNA na cauda do cometa) e frequência de micronúcleos não significativa em peixes expostos a WSF. As lesões mais significativas no fígado dos peixes expostos a WSF foram a vacuolização lipídica, hipertrofia e focos de necroses. Como estas lesões foram progressivas e persistentes, sua irreversibilidade pode afetar negativamente o recrutamento dos peixes, mesmo sendo um predador topo resistente.

Acute and subchronic effects of petroleum on the freshwater fish Hoplias aff. malabaricus / Efeitos agudo e subcrônico do petróleo no peixe de água doce Hoplias aff. malabaricus

Abstract Petroleum water soluble fraction (WSF) impairs organisms, but damages may vary among cell and tissue levels. The aim of the present study was to evaluate the acute (24 h, 48 h, 72 h) and subchronic effects (36 days) of WSF (0%, 25% and 100%) in juveniles of the Neotropical top predator fish Hoplias aff. malabaricus. The effects of WSF were evaluated at a molecular level using the comet assay and micronucleus test for genome damage; and at a morphological level through histological identification of liver pathologic lesions. In both acute and subchronic exposure we found low levels of DNA damage (< 10% of comet tail) and non-significant frequency of micronucleus in WSF exposed fish. The most significant liver lesions in WSF exposed fish were fatty vacuolization, hypertrophy and focal necrosis. Since these tissue injuries were progressive and persistent, their irreversibility may negatively affect fish recruitment, even in a such resistant top predator.

Resumo A fração solúvel de petróleo (WSF) prejudica os organismos, porém os danos podem variar entre os níveis celular e tecidual. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito agudo (24 h, 48 h e 72 h) e subcrônico (36 dias) da WSF (0%, 25% e 100%) em juvenis do peixe neotropical predador topo Hoplias aff. malabaricus. Os efeitos da WSF foram avaliados no nível molecular utilizando o ensaio do cometa e o teste do micronúcleo para o dano genômico e no nível morfológico através da identificação histológica de lesões patológicas no fígado. Em ambas exposições (aguda e subcrônica) encontramos baixos níveis de dano no DNA (< 10% de DNA na cauda do cometa) e frequência de micronúcleos não significativa em peixes expostos a WSF. As lesões mais significativas no fígado dos peixes expostos a WSF foram a vacuolização lipídica, hipertrofia e focos de necroses. Como estas lesões foram progressivas e persistentes, sua irreversibilidade pode afetar negativamente o recrutamento dos peixes, mesmo sendo um predador topo resistente.

Identification of the taxonomic status of Scinax nebulosus and Scinax constrictus (Scinaxinae, Anura) based on molecular markers / Identificação do status taxonômico de Scinax nebulosus e Scinax constrictus (Scinaxinae, Anura), baseado em marcadores moleculares

Abstract The validation of many anuran species is based on a strictly descriptive, morphological analysis of a small number of specimens with a limited geographic distribution. The Scinax Wagler, 1830 genus is a controversial group with many doubtful taxa and taxonomic uncertainties, due a high number of cryptic species. One example is the pair of species Scinax constrictus and Scinax nebulosus, which share a similar morphology. Scinax constrictus is restricted to the Brazilian Cerrado savanna, while S. nebulosus is widely distributed throughout northern South America. Despite the validation of many anuran species, discriminations based only on morphological traits is quite difficult due to the high conservative morphology of some groups. In this context, the present study uses mitochondrial and nuclear genes to provide a more consistent diagnosis and test the validity of S. constrictus as a distinct species from S. nebulosus, as well as evaluate the position of these taxa within the Scinax genus. The topologies obtained herein uphold the monophyletic status of Scinax based on all molecular markers assessed in this study, in all analytical approaches, with high levels of statistical support.

Resumo A validação de muitas espécies de anuros é baseada em uma análise morfológica e descritiva de um pequeno número de espécimes com uma distribuição geográfica limitada. O gênero Scinax Wagler, 1830 é um grupo controverso com muitos táxons duvidosos e incertezas taxonômicas devido ao grande número de espécies crípticas. Um exemplo são as espécies, Scinax constrictus e Scinax nebulosus, que compartilham uma morfologia similar. Scinax constrictus é restrito à savana do Cerrado brasileiro, enquanto S. nebulosus é amplamente distribuído pelo norte da América do Sul. Apesar da validação de muitas espécies de anuros, a discriminação baseada apenas em características morfológicas é bastante difícil, devido à alta morfologia conservadora de alguns grupos. Neste contexto, o presente estudo utiliza genes mitocondriais e nucleares para fornecer um diagnóstico mais consistente e para testar a validade de S. constrictus como uma espécie distinta de S. nebulosus, bem como avaliar a posição destes táxons dentro do gênero Scinax. As topologias obtidas confirmaram o status monofilético de Scinax com base em todos os marcadores moleculares, em todas as abordagens analíticas, com altos níveis de suporte estatístico.

Identification of the taxonomic status of Scinax nebulosus and Scinax constrictus (Scinaxinae, Anura) based on molecular markers

Abstract The validation of many anuran species is based on a strictly descriptive, morphological analysis of a small number of specimens with a limited geographic distribution. The Scinax Wagler, 1830 genus is a controversial group with many doubtful taxa and taxonomic uncertainties, due a high number of cryptic species. One example is the pair of species Scinax constrictus and Scinax nebulosus, which share a similar morphology. Scinax constrictus is restricted to the Brazilian Cerrado savanna, while S. nebulosus is widely distributed throughout northern South America. Despite the validation of many anuran species, discriminations based only on morphological traits is quite difficult due to the high conservative morphology of some groups. In this context, the present study uses mitochondrial and nuclear genes to provide a more consistent diagnosis and test the validity of S. constrictus as a distinct species from S. nebulosus, as well as evaluate the position of these taxa within the Scinax genus. The topologies obtained herein uphold the monophyletic status of Scinax based on all molecular markers assessed in this study, in all analytical approaches, with high levels of statistical support.

Resumo A validação de muitas espécies de anuros é baseada em uma análise morfológica e descritiva de um pequeno número de espécimes com uma distribuição geográfica limitada. O gênero Scinax Wagler, 1830 é um grupo controverso com muitos táxons duvidosos e incertezas taxonômicas devido ao grande número de espécies crípticas. Um exemplo são as espécies, Scinax constrictus e Scinax nebulosus, que compartilham uma morfologia similar. Scinax constrictus é restrito à savana do Cerrado brasileiro, enquanto S. nebulosus é amplamente distribuído pelo norte da América do Sul. Apesar da validação de muitas espécies de anuros, a discriminação baseada apenas em características morfológicas é bastante difícil, devido à alta morfologia conservadora de alguns grupos. Neste contexto, o presente estudo utiliza genes mitocondriais e nucleares para fornecer um diagnóstico mais consistente e para testar a validade de S. constrictus como uma espécie distinta de S. nebulosus, bem como avaliar a posição destes táxons dentro do gênero Scinax. As topologias obtidas confirmaram o status monofilético de Scinax com base em todos os marcadores moleculares, em todas as abordagens analíticas, com altos níveis de suporte estatístico.

Effects of water-soluble fraction of petroleum on growth and prey consumption of juvenile Hoplias aff. malabaricus (Osteichthyes: Erythrinidae) / Efeitos da fração solúvel de petróleo no crescimento e consumo em juvenis de Hoplias aff. malabaricus (Osteichthyes: Erythrinidae)

Abstract The influence of the water-soluble fraction of petroleum (WSF) on prey consumption and growth of juvenile trahira Hoplias aff. malabaricus was investigated. Juveniles were submitted to either WSF or Control treatment over 28 days, and jewel tetra Hyphessobrycon eques adults were offered daily as prey for each predator. Total prey consumption ranged from 16 to 86 individuals. Despite the initially lower prey consumption under WSF exposure, there were no significant differences in overall feeding rates between the two treatments. Water-soluble fraction of petroleum had a negative effect on the growth in length of H. aff. malabaricus juveniles. Although unaffected, prey consumption suggested a relative resistance in H. aff. malabaricus to WSF exposition and the lower growth of individuals exposed to WSF than the Control possibly reflects metabolic costs. The implications of the main findings for the individual and the food chain are discussed, including behavioral aspects and the role played by this predator in shallow aquatic systems.

Resumo A influência da fração solúvel de petróleo (FSP) no consumo de presas e crescimento de juvenis da traíra Hoplias aff. malabaricus foi investigada. Os juvenis foram submetidos aos tratamentos FSP e Controle durante 28 dias, e adultos de matogrosso Hyphessobrycon eques foram oferecidos diariamente como presa para cada predador. O total de presas consumidas variou de 16 a 86 indivíduos. Apesar do menor consumo inicial de presas sob exposição de FSP, não houve diferenças significativas nas taxas de consumo entre os dois tratamentos. A FSP teve um efeito negativo no crescimento em tamanho de juvenis de H. aff. malabaricus. Embora a ausência de efeito no consumo de presas sugira uma relativa resistência de H. aff. malabaricus à exposição à FSP, o menor crescimento em tamanho dos indivíduos expostos ao poluente reflete possivelmente custos metabólicos. As implicações dos principais resultados nos níveis do organismo e da cadeia alimentar são discutidos, incluindo aspectos comportamentais e o papel desempenhado por este predador em ecossistemas aquáticos rasos.

Evidence for the main foot protein gene in Perna perna (Mollusca, Mytilidae)

Here, we investigated the gene that encodes the main protein component of the byssus in Perna perna (Ppfp) using a consensus fluorescent probe for the Mytilus group and by polymerase chain reaction amplification using specific and random primers. A 524-bp fragment resulting from polymerase chain reaction amplification was found to be homologous to the fp-1 gene of Mytilus coruscus. This fragment was identified as the 3’ end of the Ppfp-1 gene, which included the heptapeptide coding sequence for Lys-Pro-Ser-Tyr-Pro-Pro-Ter (probably the incomplete last tandem repeat unit of the giant exon), the stop codon and the polyadenylation signal.

Temporal genetic differentiation in cultured and natural beds of the brown mussel Perna perna (Mytilidae)

Perna perna is the most important cultivated mussel of Santa Catarina, Brazil, sustaining an important economic input for many local families. Natural stocks of P. perna are depleted by the extraction of adults and seeds for consumption and culture. The aim of the present study was to use the microsatellite locus pms-2 to study the variation of the genetic composition and diversity between natural and cultured stocks in samples of 2001 and 2005 from Penha, Santa Catarina. DNA was extracted from adductor muscle by Chelex/proteinase-K and phenol/chloroform protocols. Amplification by polymerase chain reaction was performed using specific primers for analyzing the pms-2 locus. Polymerase chain reaction products were submitted to vertical denatured 6% polyacrylamide gel electrophoresis and horizontal 2% agarose gel electrophoresis, and visualized by silver staining and ethidium bromide, respectively. Allele diversity and heterozygote deficiency were higher for samples of 2005 than for those of 2001. No significant genetic differentiation was found between natural and cultured stocks of 2001 by the c2 test, but G2 (likelihood ratio) detected slight differences (I = 0.949; c2, P = 0.147; G2, P = 0.046), while cultured and natural stocks of 2005 were very different (I = 0.798, P = 0.006). Between the years of 2001 and 2005, a large change in genetic composition was observed (I = 0.582; P < 0.001). Although nothing is known about natural changes in the genetic composition of this species with time, the results suggest a strong impact of human activities on natural stocks of P. perna, which is expected to be related to heavy extraction and farming

Asociación de la infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) y tuberculosis / Association of human immunodeficiency virus infection and tuberculosis

Se estudiaron 129 enfermos con tuberculosis grave y 1 con micobacteriosis debida a M. avium intracellulare internados en el Pabellón Koch del Hospital Francisco J. Miñiz durante el primer bimestre de 1988. Se hallaron anticuerpos contra HIV en 4 pacientes (3,1%), 3 hombres y una mujer. Todos ellos tenían algun factor de riesgo para infección con HIV: de los hombres, uno era bisexual y los otros dos declararon ser promiscuos; la mujer era pareja sexual de un individuo HIV positivo. En ninguno se detectaron trastornos inmunológicos, ni otras alteraciones atribuibles a la infección con HIV. Los 4 pacientes presentaron formas de tuberculosis pulmonar graves y en un caso diseminación miliar. No se hallaron formas atípiicas ni extrapulmonares. La prueba tuberculínica fue positiva en 3 de los 4 pacientes. La respuesta clínica, radiológica y bacteriológica fue favorable. Se produjeron reacciones adversas medicamentosas en dos pacientes, debiéndose suspender la administración de isoniacida en uno de ellos, debido a una toxidermia grave. La presentación y evolución de la tuberculosis fue similar en todos no habiéndose encontrado ninguna variable que permitera discriminar entre los HIV positivos o negativos. Enfatizamos la necesidad de realizar un estudio epidemiológico similar de mayor envergadura para detectar la tendencia ascendente que problablemente tendrá la asociación entre tuberculosis e infección con HIV